本文標題:細胞免疫染色法，了解細胞內胞器的分布情形

實驗結果

一、 利用細胞免疫染色法，了解細胞內胞器的分布情形。

我們使用Hochest 33258此種螢光物質與DNA結合發出藍色螢光，可以指示細胞核所在的位置。接著加入會辨識Golgin-245（一種已知會位于哺乳動物細胞內高基氏體的蛋白質）的抗體，以及具有綠色螢光物質標定的二級抗體進行免疫染色作用。我們觀察到細胞中有綠色螢光訊息的區域，得知高基氏體這種胞器所在的位置。

二、CTB-594 nm的內胞作用。

為了觀察細胞的內胞作用，我們以會激發出紅光的CTB-594 nm分子（一種會被細胞經內胞作用而運送至高基氏體的毒蛋白質）與活細胞作用30分鐘后，發現CTB-594 nm (紅光) 會與標示高基氏體的Golgin-245 (綠光) 訊號重疊，表示CTB-594 nm分子的確會被運送至高基氏體，由此可以得知內胞作用的存在。

三、Tf-488 nm的內胞作用。

為了觀察細胞的內胞作用，我們以會激發出綠光的Tf-488 nm分子（一種會被細胞經內胞作用而運送至高基氏體的運輸蛋白質）與活細胞作用30分鐘后，發現Tf-488 (綠光) 會與標示高基氏體的Golgin-245 (紅光) 訊號重疊，表示Tf-488 nm分子的確會被運送至高基氏體，由此可以得知內胞作用的存在。（因Tf-488 nm被激發后會發出綠光，所以我們改用會被激發出紅光的Golgin-245來作為高基氏體的標示物）。

四、VSVG-GFP的外釋作用。

我們利用VSVG-GFP（一種病毒醣蛋白質與綠色螢光蛋白質結合的分子）來觀察此種蛋白質在細胞內的運輸過程，實驗結果顯示綠色的螢光物質散佈在細胞膜及細胞間質中，由此可知VSVG-GFP在內質網合成并運送至高基氏體后，會再運送至細胞膜。

五、蛋白質運送的調節作用。

我們已知ARL1這種分子會調節蛋白質的運輸作用，所以運用轉染的方式讓細胞同時大量表現ARL1突變株 (ARL1QL) 、VSVG-GFP (綠色)，觀察在有ARL1QL存在時，VSVG-GFP將無法順利地輸送至細胞膜上，轉而堆積在高基氏體中。